1、 開機 

打開儀器的主電源，打開電腦電源。待儀器自檢完畢（CU950上面的3個指示燈完全點亮并不閃爍）。雙擊桌面上UNICORN圖標(biāo)，進(jìn)入操作界面。 2、 準(zhǔn)備工作溶液和樣品 

所有的工作溶液和樣品必須經(jīng)過0.45µm的濾膜過濾，樣品也可高速離心后取上清備用。當(dāng)緩沖液中含有有機溶劑（如乙腈、甲醇），需在使用前用低頻超聲脫氣10min。 3、 清洗及管道準(zhǔn)備 

shou先將A1管道放入緩沖液或平衡液，binding buffer中，將B1管道放入高鹽溶液中或elution buffer，在system control窗口點擊工具欄內(nèi)的manual，選擇 pump→pump wash purifier，選中A1,B1管道為ON， execute。泵清洗將自動結(jié)束。 4、 安裝層析柱 

在manual里選擇pump→flow rate，輸入流速1ml/ml，insert；選擇Alarm&mon→alarm pressure，設(shè)置high alarm（輸入填料的耐受壓力，可在填料說明書中查到），insert，execute。待

InjectionValve的1號位管道流出水后接入柱子的柱頭，稍微擰緊后將柱下端的堵頭卸掉接入管道連上紫外流動池。 

5、 開始純化： 

1）選擇檢測波長，Alarm&mon→Wavelength→UV1,UV2,UV3(可以直打開一個波長)等待柱子平衡好了（觀察電導(dǎo)COND，pH的數(shù)值和變化趨勢）就準(zhǔn)備上樣了。此時將紫外調(diào)零，選擇Alarm&mon→autozero，exectue。 

2）用樣品環(huán)上：將樣品吸進(jìn)注射器，推掉氣泡，從injectionValve的3號位推入,推好后不要取下注射器。在manual里選擇flowpath→injectionValve→inject，execute。 

3）用泵上樣：有A2入口）manual里選擇flowpath→Ainlet→A2, insert, flowpath→injectmark, insert, execute待樣品上完后，再將manual里選擇flowpath→Ainlet→A1,平衡液中繼續(xù)清洗柱子 

2),3)選擇一種方式 2),3)選擇一種方式 

4）洗脫：上樣后用緩沖液盡量將穿透峰洗回基線。在manual里選擇pump→gradient，按照自己的工藝選擇targetB（100％）和length（10CV）。 

5）設(shè)定收集： 

固定體積收集：選擇Frac→Man_fractionation,選擇收集Rack型號、收集順序以及tube類型，輸入每管收集體積，exectue。結(jié)束固定體積收集選擇Frac→fractionation_stop，exectue。 

峰收集：選擇Frac→Peak_fracParametersUV_Level,設(shè)定峰收集的參數(shù)，選擇Frac→Peak_Man_fractionation設(shè)定峰收集每管收集的體積，exectue。結(jié)束峰收集選擇Frac→Peak_frac_stop，exectue。 6、 清洗泵及卸下層析柱： 

將A1和B1入口放入純水中，啟動pump wash purifier功能沖洗A泵和B泵及整個管路。然后再將A1和B1入口放入20％乙醇中，同樣操作將乙醇沖滿整個管路保存。系統(tǒng)給柱子一個慢流速，設(shè)置系統(tǒng)保護(hù)壓力，然后先拆柱子的下端，正在滴水的時候?qū)⒍骂^擰上，再拆柱子的上端，**后擰上上端的堵頭。整個過程防止氣泡進(jìn)入。 7、 關(guān)閉電源： 

    從軟件控制系統(tǒng)的**個窗口unicorn manager點擊退出，其他窗口不能單獨關(guān)閉。然后關(guān)閉AKTA主機電源，關(guān)閉電腦電源。