層析法是利用不同物質(zhì)理化性質(zhì)的差異而建立起來的技術(shù)。所有的層析系統(tǒng)都由兩個(gè)相組成：一是固定相，它或者是固體物質(zhì)或者是固定于固體物質(zhì)上的成分；另一是流動(dòng)相，即可以流動(dòng)的物質(zhì)，如水和各種溶媒。當(dāng)待分離的混合物隨溶媒（流動(dòng)相）通過固定相時(shí)，由于各組份的理化性質(zhì)存在差異，與兩相發(fā)生相互作用（吸附、溶解、結(jié)合等）的能力不同，在兩相中的分配（含量對(duì)比）不同，而且隨溶媒向前移動(dòng)，各組份不斷地在兩相中進(jìn)行再分配。與固定相相互作用力越弱的組份，隨流動(dòng)相移動(dòng)時(shí)受到的阻滯作用小，向前移動(dòng)的速度快。反之，與固定相相互作用越強(qiáng)的組份，向前移動(dòng)速度越慢。分部收集流出液，可得到樣品中所含的各單一組份，從而達(dá)到將各組份分離的目的。  

表 按層析原理分類 

   名稱   分離原理 

吸附層析法 組份在吸附劑表面吸附固定相是固體吸附劑，各能力不同 分配層析法 各組份在流動(dòng)相和靜止液相（固相）中的分配系數(shù)不同 離子交換層析法 固定相是離子交換劑，各組份與離子交換劑親和力不同 

凝膠層析法 固定相是多孔凝膠，各組份的分子大小不同，因而在凝膠上受阻滯的程度不同 親和層析法 是根據(jù)生物大分子和配體之間的特異性親和力（如酶和抑制劑、抗體和抗原、激素和受體等），將某種配體連接在載體上作為固定相，而對(duì)能與配體特異性結(jié)合的生物大分子進(jìn)行分離的一種層析技術(shù)。親和層析是分離生物大分子**為有效的層析技術(shù)，具有很高分辨率。 

表 按操作形式不同分類 名稱 操作形式 

柱層析法 固定相裝于柱內(nèi)，使樣品沿著一個(gè)方向前移而達(dá)分離 

薄層層析法 將適當(dāng)粘度的固定相均勻涂鋪在薄板上，點(diǎn)樣后用流動(dòng)相展開，使各組份分離 紙層析法 用濾紙作液體的載體，點(diǎn)樣后用流動(dòng)相展開，使各組份分離 

薄膜層析法 將適當(dāng)?shù)母叻肿佑袡C(jī)吸附劑制成薄膜，以類似紙層析方法進(jìn)行物質(zhì)的分離  

依流動(dòng)相分 

根據(jù)流動(dòng)相的形式分類，層析可以分為液相層析和氣相層析。 1、氣相層析是指流動(dòng)相為氣體的層析。 2、液相層析指流動(dòng)相為液體的層析。 

Rf值：主要是紙上層析法的用詞。源自流速（rate of flow）。溶劑從原點(diǎn)滲透到距離a（一般在20—30厘米時(shí)測(cè)定）的時(shí)候，如果位于原點(diǎn)的物質(zhì)從原點(diǎn)向前移動(dòng)到b，那么b/a的值（0.0—1.0）就是這種物質(zhì)的Rf值。